عنوان:
کلونینگ توالی کامل ژنوم ویروس موزائیک توتون
چکیده فارسی
ویروس موزائیک توتون (TMV) ، یکی از مهمترین عوامل بیماریزا در تمام دنیا است که افزون از 200 گونه گیاهی را آلوده می نماید. تمام یک از اجزای مختلف ژنوم دارای نقش مهمی باب ساختار ژنوم ویروس می باشد، از جمله پروتئین حرکتی که در حرکت سلول به سلول در TMV موثراست و پروتئین پوششی که نقش مهمی در پایداری و انتقال ویروس ایفا میکند. درایران در خصوص تعیین توالی کامل ژنوم ویروس موزائیک توتون حرف کنون اقدامی صورت نگرفته است. لذا تعیین توالی میکرب و خواندن تفاوت های جدایه های موجود در کشور با اطلاعات موجود در منبعها از جمله اقدامات اولیه و ضروری جهت انجام مطالعات مولکولی روی این ویروس است، بنابراین حرف آماج بررسی توالی ژن کدکننده پروتئین حرکتی و پروتئین پوششی در جدایه گزارش شده از ایران و مقایسه توالی تعیین ترادف شده با جدایه های مختلف در بانک ژن NCBI مطالعه اسم اجرا شد. توالی ژن کدکننده این پروتئین ها در جدایه های منطقهها جوراجور دنیا گزارش شده است. استحصال RNA ژنومی ویروس از برگ گیاهان توتون پلید بدست آمد و با استفاده از پرایمر PSh60-R1 بار ساخت cDNA اجرا شد. حرف استفاده از آغازگرهای اختصاصی PSh63-F و PSh60-R1 منطقه کدکننده پروتئین حرکتی و پروتئین پوششی تکثیر و بصورت دو جهته توالی یابی شد. همردیفی توالی بدست آمده با توالی مشابه از نژادهای مختلف انجام شد و درخت خویشاوندی رسم گردید. نتایج نشان داد جدایه اعلام شده از ایران با نژاد TMV-U1 قرابت بالائی دارد. از بین 799 جایگاه در سطح نوکلئوتید برای پروتئین حرکتی 6 پرش در مقایسه حرف نژاد TMV-U1 مشاهده و در مجموع 266 اسید آمینه 2 جهش دیده شد. آنالیزهای انجام شده براساس توالی نوکلئوتیدی کد کننده ارض پروتئین پوششی ویروس در مقایسه با نژاد TMV-U1 2 جهش در سطح نوکلئوتید را آرم داد. باب توالی های بالادست و بینابین دو ژن کدکننده پروتئین پوششی و حرکتی نیز جهش هایی مشاهده شد. پرش باب این منطقهها به دلیل نقش تنظیمی در بیان ژن حائز اهمیت است.
سیاهه مطالب
آغاز صفحه
فصل اول:کلیات تحقیق........................................................................................................1
1-1- ویروس موزائیک توتون...............................................................................................1
1-2- خصوصیات فیزیکی ویروس........................................................................................2
1-3- اهمیت میکرب موزائیک توتون....................................................................................2
1-4- اهداف مطالعه...................................................................................................... .......4
فصل دوم: مبانی نظری و پیشینه تحقیق
2-2-جزئیات ویروس (خصوصیات فیزیکی)
2-6-همانندسازی (رونوشت ویروس باب سلول میزبان)
2-7-ساختار ژنوم و ORF ها و نواحی غیر کد شونده
2-7-1- عملکرد پروتئینهای ویروس
2-7-1-2- پروتئین 126 و 183 کیلو دالتون
2-9- کارهای اجرا شده در خصوص ویروس موزائیک توتون
3-2-1- آییننامه 1: مرحلهها استخراج RNA از بافت گیاه حرف استعمال از کیت
3-4- آنالیز بیوانفورماتیک و طراحی آغازگرها
3-4-1- بازیابی توالی ژنوم ویروس موزائیک توتون
3-4-2- همردیفی جدایه های مختلف ویروس به منظور طراحی آغازگرها
3-5- بهینه سازی تکثیر قطعه کامل ژنوم ویروس موزائیک توتون با استفاده از آغازگرهای اختصاصی مختلف..................................................................................................... ......
3-5-2- واکنشNested PCR حرف آغازگرهای (PSh60F/PSh60R2) با استفاده از DNA تکثیر شده باکیتLong
مقدمه:
روانشناسی ورزشی[1] شاخهای از علم ورزش است که در جستجوی فراهم نمودن پاسخ به سؤالات جوراجور باب زمینههای رفتار انسانی در حیطه ورزش است. از آنجایی که روانشناسی به مطالعه رفتار میپردازد، بالطبع موضوع روانشناسی ورزشی نیز مطالعه حرکات و فعالیتهای ورزشی در قید ابعاد از فعالیت حرکتی یک کودک دبستانی تا مسابقات جهانی و المپیک میباشد.
اگر چاه اهمیّت مسائل روانی در بازی از چندین واحد زمان ( پیش شناخته شده است با این حال روانشناسی ورزشی هنوز دانشی بسیار جوان میباشد و در خلال دهههای اخیر اشتیاق و توجه به سمت «روانشناسی ورزشی شناختی[2]» افزایش چشمگیری یافته است. ابتدا تمام تلاشها در این حیطه معطوف به مردان قهرمان بود اما در سالهای اخیر این جریان متحول شده است و روانشناسی ورزشی قهرمانان زن و اسم حرفهای و سرآمد افراد شرکت کننده در فعالیتهای غیر حرفهای را نیز مورد تدقیق قرار میدهد. به سمت عبارتی آماج روانشناسی ورزشی کمک به ورزشکاران در قید ردههای سنی از نوجوانان حرف بزرگسالان است.
امروزه متخصصان فیزیولوژی ورزش از اندیشه روانشناسی ورزشی برای کمک به سمت شرکتکنندگان در برنامههای باز پروری قلبی استفاده میکنند حرف آنها بر اضطراب خود نسبت به از سرگیری و شروع تمرین غلبه کنند. معلمان همچنین حرف استفاده از دانش روانشناختی ورزشی شیوه توجه به تأثیرات محیطی را که باعث تندرستی اجرا میشوند، به سمت متعلمان خود میآموزانند. دست اندر کاران تیمهای جوانان برای اطمینان از کسب آزمایشها صفت از سوی ورزشکاران جوان، از روانشناسی ورزشی بهره میگیرند. و نهایتاً مربیان باب قید سطوح از تکنیکهای روانشناسی ورزشی همچون کنترل هیجان، تصویر سازی ذهنی، آماج گزینی و انگیزش کمک میگیرند تا ورزشکاران را در تکامل بخشیدن اجراهایشان یاری دهند. اکنون حرف پیشرفت بیرق روانشناسی ورزشی، بحث مهارتهای روانی باب اجرای عملکردهای ورزشی از اهمییت بسزایی بهرهمند شده است و در حالی که قبلاً به سمت اهمیت آماده سازی جسمانی تأکید میشد امروزه قهرمانان هرچه بیشتر حرف آماده سازی روانی توجه و تأکید میکنند. آزمایشها کسب شده آنان حاکی از آنست که وقتی باب میدانهای ارجمند با قهرمانانی همتراز به دید جسمیبه رقابت میپردازند، سرانجام آمادگی روانی پیروزی را به بهره یکی از طرفین رقم خواهد زد.